• <small id="emyek"></small><li id="emyek"></li>
  • <td id="emyek"><button id="emyek"></button></td><td id="emyek"></td>
  • <button id="emyek"><button id="emyek"></button></button><small id="emyek"></small>
  • <small id="emyek"></small>
  • <small id="emyek"><td id="emyek"></td></small>
  • <td id="emyek"><li id="emyek"></li></td>
  • <td id="emyek"></td><small id="emyek"><li id="emyek"></li></small>
  • 首頁 >> 實驗指南 >>微生物學 >> 細菌生化反應培養基 中國藥典2020版四部通則3605
    详细内容

    細菌生化反應培養基 中國藥典2020版四部通則3605

    中國藥典2020版四部通則3605

    細菌生化反應培養基


      下列各類培養基常用于測定細菌的糖類代謝試驗、氨基酸和蛋白質代謝試驗、碳源和氮源利用試驗等生化反應。

      1.糖、醇發酵培養基

     。1)成分

      基礎液

      蛋白胨                                                                                              10g

      氯化鈉                                                                                                5g

      0.5%酸性品紅指示液                                                                            10ml

     。ɑ0.4%溴麝香草酚藍指示液)                                                    (6ml)

      水                                                                                                1000ml

      糖、醇類                                                             每100ml基礎液內各加0.5g

     。2)制法 取蛋白胨和氯化鈉加入水中,微溫使溶解,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,加入指示液混勻。每100ml分別加入1種糖、醇或糖苷,混勻后分裝于小管中(若需觀察產氣反應,在小管內另放置杜漢小倒管)。于116℃滅菌15分鐘。

      常用的糖、醇或糖苷:阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、蕈糖、纖維二糖、蜜二糖、棉子糖、松三糖、菊糖、糊精、淀粉、甘露醇、衛矛醇、山梨醇、肌醇、甘油、水楊素、七葉苷等。

      (3) 用途 鑒別各種細菌對糖類的發酵生化反應,發酵者產酸,培養基變色(加酸性品紅者由無色至紅色或再至黃色;加溴麝香草酚藍者由藍色至黃色);產氣時,小倒管內有小氣泡。

      2.七葉苷培養基

      (1)成分

      蛋白胨         5g 七葉苷 3g

      磷酸氫二鉀 1g 1000ml

      枸櫞酸鐵 0.5g

      (2)制法 除七葉苷外,取上述成分混合,微溫使溶解,加入七葉苷混勻,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,分裝于試管中,121℃滅菌15分鐘。

      (3)用途 用于鑒別細菌對七葉苷的水解試驗,產生棕黑色沉淀為陽性反應。

      3.磷酸鹽葡萄糖胨水培養基

      (1)成分

      蛋白胨        7g   葡萄糖 5g

      磷酸氫二鉀 3.8g水 1000ml

      (2)制法 取上述成分混合,微溫使溶解,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,分裝于小試管中,121℃滅菌15分鐘。

      (3)用途 用于鑒別細菌的甲基紅試驗(M-R反應)和乙酰甲基甲醇試驗(V-P反應)。

     、偌谆t試驗(M-R反應) 取可疑菌落或斜面培養物,接種于磷酸鹽葡萄糖胨水培養基中,置35℃培養2~5天,于培養管內加入甲基紅指示液(稱取甲基紅0.1g,加95%乙醇300ml,使溶解后,加水至500ml)數滴,立即觀察,呈鮮紅色或橘紅色為陽性,呈黃色為陰性。

     、谝阴<谆状忌稍囼(V-P反應) 取可疑菌落或斜面培養物,接種于磷酸鹽葡萄糖胨水培養基中,置35℃培養48小時,量取2ml培養液,加入α-萘酚乙醇試液(稱取α-萘酚5g,加無水乙醇溶解使成100ml)1ml,混勻,再加40%氫氧化鉀溶液0.4ml,充分振搖,立刻或數分鐘內出現紅色,即為陽性反應;無紅色反應為陰性,如為陰性反應,置35℃水浴4小時后再觀察。

      4.蛋白胨水培養基

      (1)成分

      蛋白胨 10g 1000ml

      氯化鈉 5g

      (2)制法 取上述成分混合,微溫使溶解,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,分裝于小試管,121℃滅菌15分鐘。

      (3)用途 用于鑒別細菌能否分解色氨酸而產生靛基質的生化反應。

     、俚寤|試驗 取可疑菌落或斜面培養物,接種于蛋白胨水培養基中,置35℃培養24~48小時,必要時培養4~5天,沿管壁加入靛基質試液數滴,液面呈玫瑰紅色為陽性,呈試劑本色為陰性。

     、诘寤|試液 稱取對二甲氨基苯甲醛5g,加入戊醇(或異戊醇)75ml,充分振搖,使完全溶解后,再取鹽酸25ml徐徐滴入,邊加邊振搖,以免驟熱導致溶液色澤變深;蚍Q取對二甲氨基苯甲醛1g,加入95%乙醇95ml,充分振搖,使完全溶解后,再取鹽酸20ml徐徐滴入。

      5.三糖鐵瓊脂培養基

      (1)成分

      蛋白胨        20g 硫酸亞鐵    0.2g

      牛肉浸出粉 5g 硫代硫酸鈉 0.2g

      乳糖     10g 0.2%酚磺酞指示液 12.5ml

      蔗糖  10g 瓊脂                        12~15g

      葡萄糖 1g                      1000ml

      氯化鈉 5g

      (2)制法 除乳糖、蔗糖、葡萄糖、指示液、瓊脂外,取上述成分,混合,加熱使溶解,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,加入瓊脂,加熱溶脹后,再加入其余成分,搖勻,分裝,121℃滅菌15分鐘,制成高底層(2~3cm)短斜面。

      (3)用途 用于初步鑒別腸桿菌科細菌對糖類的發酵反應和產生硫化氫試驗。

      方法和結果觀察:取可疑菌落或斜面培養物,做高層穿刺和斜面劃線接種,置35℃培養24~48小時,觀察結果。培養基底層變黃色為葡萄糖發酵陽性,斜面層變黃色為乳糖、蔗糖發酵陽性;底層或整個培養基呈黑色表示產生硫化氫。

      6.克氏雙糖鐵瓊脂培養基

      (1)成分

      蛋白胨        20g 枸櫞酸鐵 0.3g

      牛肉浸出粉 3g 硫代硫酸鈉 0.3g

      酵母浸粉      3g 0.2%酚磺酞指示液 12.5ml

      乳糖               10g 瓊脂         12~15g

      葡萄糖        1g        1000ml

      氯化鈉 5g

      (2)制法 除乳糖、葡萄糖、指示液、瓊脂外,取上述成分,混合,加熱使溶解,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,加入瓊脂,加熱溶脹后,再加入其余成分,搖勻,分裝,121℃滅菌15分鐘,制成高底層(2~3cm)短斜面。

      (3)用途 用于初步鑒別腸桿菌科細菌對糖類的發酵反應和產生硫化氫試驗。

      方法和結果觀察:取可疑菌落或斜面培養物,做高層穿刺和斜面劃線接種,置35℃培養24~48小時,觀察結果。培養基底層變黃色為葡萄糖發酵陽性,斜面層呈黃色為乳糖發酵陽性,斜面層呈紅色為乳糖發酵陰性;底層或整個培養基呈黑色表示產生硫化氫。

      7.脲(尿素)培養基

      (1)成分

      蛋白胨 1g 0.2%酚紅溶液 6ml

      葡萄糖 1g 20%無菌脲溶液100ml

      氯化鈉 5g 1000ml

      磷酸氫二鉀 2g

      (2)制法 除脲溶液外,取上述成分,混合,調pH值使滅菌后為6.9±0.1,混勻后,121℃滅菌15分鐘,冷至50~55℃,加入無菌脲溶液(經膜除菌過濾),混勻,分裝于滅菌試管中。

      (3)用途 用于鑒別細菌的尿素酶反應。

      方法和結果觀察:取可疑菌落或少量斜面培養物接種于培養基內,置35℃培養24小時,觀察結果。培養基變為紅色為尿素酶反應陽性;不變色為陰性,陰性者需延長觀察至1周。

      8.苯丙氨酸瓊脂培養基

      (1)成分

      磷酸氫二鈉 1g 氯化鈉 5g

      酵母浸膏    3g 瓊脂 12~15g

      DL-苯丙氨酸(DL-phenylalanine) 2g 1000ml

      (或L-苯丙氨酸) (1g)

      (2)制法 除瓊脂外,取各成分溶于水,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,再加入瓊脂,加熱溶脹,分裝試管,121℃滅菌15分鐘,制成長斜面。

      (3)用途 用于鑒別細菌的苯丙氨酸脫氨酶試驗(也稱苯丙酮酸試驗)。

      方法和結果觀察:取斜面培養物,大量接種于苯丙氨酸瓊脂斜面,置35℃培養4小時或18~24小時,取4~5滴10%三氯化鐵溶液試劑,由斜面上部流下,若出現墨綠色,即為苯丙氨酸脫氨酶試驗陽性;倘若不變色則為陰性。

      9.氨基酸脫羧酶試驗培養基

      (1)成分

     、倩A液

      蛋白胨 5g 1.6%溴甲酚紫指示液 1ml

      酵母浸出粉 3g 1000ml

      葡萄糖 1g

     、诎被

      L-賴氨酸 0.5g (需加堿溶液溶解)

      L-鳥氨酸 0.5g (需加堿溶液溶解)

      L-精氨酸 0.5g (不需加堿溶液溶解)

      (2)制法 先配制基礎液備用;將溶解后的3種氨基酸,各分別加至100ml基礎液(使氨基酸的終濃度為0.5%),混勻,調pH值使滅菌后為6.8。分裝于小試管中,每管2.5ml并滴加1層液狀石蠟;同時分裝一部分基礎液于小試管,作為對照培養基,均置116℃滅菌10分鐘。

      (3)用途 用于鑒別細菌的脫羧酶、雙水解酶試驗。

      方法和結果觀察:取疑似菌斜面培養物分別接種于上述3種培養基及基礎液對照培養基,置35C培養24~48小時。在培養初期由于待檢細菌發酵葡萄糖產酸,試驗培養基和對照培養基應呈黃色,繼續培養時,試驗培養基如呈紫色或紫紅色,即為陽性反應;如至培養末期,培養基仍同對照管呈黃色,則判為陰性反應。

      10.明膠培養基

      (1)成分

      蛋白胨 5g 明膠 120g

      牛肉浸出粉     3g 1000ml

      (2)制法 取上述成分加入水中,浸泡約20分鐘,加熱溶解,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,分裝于小試管中,121℃滅菌15分鐘。

      (3)用途 用于細菌的明膠液化試驗。

      方法和結果觀察:取少量待檢菌斜面培養物穿刺接種于明膠培養基內,置35℃培養24小時,取出置冰箱內10~20分鐘。如培養基仍呈溶液狀,則為陽性;培養基重新凝固,則為陰性。細菌液化明膠之作用有時甚為緩慢,如未見液化,需繼續培養1~2周方可確定陰性。

      11.丙二酸鈉培養基

      (1)成分

      酵母浸出粉 1g 磷酸二氫鉀 0.4g

      氯化鈉 2g 丙二酸鈉 3g

      葡萄糖 0.25g 0.4%溴麝香草酚藍指示液 6ml

      硫酸銨 2g 1000ml

      磷酸氫二鉀 0.6g

      (2)制法 除指示液外,將上述成分溶解,調pH值使滅菌后為6.8,再加入指示液。分裝小管中,121℃滅菌15分鐘。

      (3)用途 用于鑒別細菌能否利用丙二酸鈉作為碳源而生長繁殖。

      方法和結果觀察:取斜面或肉湯培養物接種于丙二酸鈉培養基內,置35℃培養48小時。于24小時和48小時后各觀察1次結果。培養基顏色由綠色變成藍色為陽性反應;無顏色變化,或由綠色變成黃色,則為陰性反應。

      12.枸櫞酸鹽培養基

      (1)成分

      氯化鈉 5g 枸櫞酸鈉(無水) 2g

      硫酸鎂 0.2g 1.0%溴麝香草酚藍指示液 10ml

      磷酸氫二鉀 1g 瓊脂 14g

      磷酸二氫銨 1g 1000ml

      (2)制法 除指示液和瓊脂外,取上述成分,混合,微溫使溶解,調pH值使滅菌后為6.9±0.1,加入瓊脂,加熱溶脹,然后加入指示液,混勻,分裝于小試管中,121℃滅菌15分鐘,制成斜面。

      (3)用途 用于鑒別細菌能否利用枸櫞酸鹽作為碳源和氮源而生長繁殖。

      方法和結果觀察:取可疑菌落或斜面培養物,接種于枸櫞酸鹽培養基的斜面上,一般培養48~72小時,凡能在培養基斜面生長出菌落,培養基即由綠色變成藍色者為陽性反應;無菌落生長,培養基仍綠色者為陰性反應,陰性反應者應繼續培養觀察至7天。

      13.硝酸鹽胨水培養基

      (1)成分

      蛋白胨 10g 硝酸鉀 2g

      酵母浸出粉3g 1000ml

      (2)制法 取上述成分,加熱溶解,調pH值使滅菌后為7.3±0.1,分裝于小試管中,121℃滅菌15分鐘。

      (3)用途 用于鑒別細菌能否還原硝酸鹽成亞硝酸鹽。

      方法和結果觀察:取待檢菌培養物接種于硝酸鹽胨水培養基中,置35℃培養24小時。將下列甲液和乙液于用前等量混合,每個培養物加混合物0.1ml,產生紅色為陽性反應,不產生紅色為陰性反應。

      甲液:稱取α-萘胺5g,溶解于5mol/L醋酸1000ml中。

      乙液:稱取磺胺酸(對氨基苯磺酸)8g,溶解于5mol/L醋酸1000ml中。

      14.石蕊牛奶培養基

      (1)成分

      脫脂奶粉 10g 水100ml

      10%石蕊溶液 0.65ml

      (2)制法 取上述成分混勻后,分裝于小試管中,116℃滅菌10分鐘。

      (3)用途 用于檢查細菌對牛奶的凝固和發酵作用。

      15.半固體營養瓊脂培養基

      (1)成分

      蛋白胨 10g 瓊脂 4g

      牛肉浸出粉 3g 1000ml

      氯化鈉 5g

      (2)制法 除瓊脂外,取上述成分,混合,微溫使溶解,調pH值使滅菌后為7.2±0.2,再加入瓊脂,加熱溶脹,分裝于小管中,121℃滅菌15分鐘后,直立放置。待凝固后備用。

      (3)用途  用于觀察細菌的動力,也可用于一般菌種的保存。

      細菌動力檢查:取疑似菌斜面培養物穿刺接種于半固體營養瓊脂培養基中,置35℃培養24小時,細菌沿穿刺外周擴散生長,為動力陽性;否則為陰性。陰性者,應再繼續培養觀察2~3天。


    購物流程

    支付/配送

    售后服務

    關于我們

    微信訂貨

      Copyright @ 2011-2022. All rights reserved. 天津西瑪科技有限公司 版權所有

    津ICP備20004793號-1

    發貨查詢
    E-mail:
    19725998@qq.com;sales@sima-lab.com
    QQ:957983659;
    QQ:956277045

    電話/傳真:022-58201211

    客服中心
    联系方式
    18622987668
    - 客服一
    - 客服二
    微信客服
    seo seo
    AV片在线观看
  • <small id="emyek"></small><li id="emyek"></li>
  • <td id="emyek"><button id="emyek"></button></td><td id="emyek"></td>
  • <button id="emyek"><button id="emyek"></button></button><small id="emyek"></small>
  • <small id="emyek"></small>
  • <small id="emyek"><td id="emyek"></td></small>
  • <td id="emyek"><li id="emyek"></li></td>
  • <td id="emyek"></td><small id="emyek"><li id="emyek"></li></small>