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    旋光度測定法 中國藥典2020版四部-通則0621

    旋光度測定法

    中國藥典2020版四部-通則0621

      平面偏振光通過含有某些光學活性化合物的液體或溶液時,能引起旋光現象,使偏振光的平面向左或向右旋轉。旋轉的度數,稱為旋光度。在一定波長與溫度下,偏振光透過每 1ml 含有 1g 旋光性物質的溶液且光路為長 1dm 時,測得的旋光度稱為比旋度。比旋度(或旋光度)可以用于鑒別或檢查光學活性藥品的純雜程度,亦可用于測定光學活性藥品的含量。

      在空間上不能重疊,互為鏡像關系的立體異構體稱為對映體。手性物質的對映異構體之間,除了使平面偏振光發生偏轉的程度相同而方向相反之外,在非手性環境中的理化性質相同。生物大分子如酶、生物受體等通常為手性物質,總是表現出對一種對映體的立體選擇性,因此,對映體可在藥理學與毒理學方面有差異。來源于自然界的物質,例如氨基酸、蛋白質、生物堿、抗體、糖苷、糖等,大多以對映體的形式存在。外消旋體一般由等量的對映異構體構成,旋光度凈值為零,其物理性質也可能與其對映體不同。
      最常用的光源是采用鈉燈在可見光區的 D 線(589.3nm),但也使用較短的波長,如光電偏振計使用濾光片得到汞燈波長約為 578nm、546nm、436nm、405nm 和 365nm 處的最大透射率的單色光,其具有更高的靈敏度,可降低被測化合物的濃度。還有一些其他光源,如帶有適當濾光器的氙燈或鹵鎢燈。
      除另有規定外,本法系采用鈉光譜的 D 線(589.3nm)測定旋光度,測定管長度為 1dm(如使用其他管長,應進行換算),測定溫度為 20℃。用讀數至 0.01° 并經過檢定的旋光計。
      旋光度測定一般應在溶液配制后 30 分鐘內進行測定。測定旋光度時,將測定管用供試液體或溶液(取固體供試品,按各品種項下的方法制成)沖洗數次,緩緩注入供試液體或溶液適量(注意勿使發生氣泡),置于旋光計內檢測讀數,即得供試液的旋光度。使偏振光向右旋轉者(順時針方向)為右旋,以“+”符號表示;使偏振光向左旋轉者(反時針方向)為左旋,以“-”符號表示。用同法讀取旋光度 3 次,取 3 次的平均數,照下列公式計算,即得供試品的比旋度。
      對液體供試品image.png

      對固體供試品image.png

      式中 [α] 為比旋度;
      D 為鈉光譜的 D 線;
      t 為測定時的溫度,℃;
      l為測定管長度,dm;
      α 為測得的旋光度;
      d 為液體的相對密度;
      c 為每 100ml 溶液中含有被測物質的重量(按干燥品或無水物計算),g。
      旋光計的檢定,可用標準石英旋光管進行,讀數誤差應符合規定。
      【注意事項】 。1)每次測定前應以溶劑作空白校正,測定后,再校正 1 次,以確定在測定時零點有無變動;如第 2 次校正時發現旋光度差值超過 ±0.01 時表明零點有變動,則應重新測定旋光度。
     。2)配制溶液及測定時,均應調節溫度至 20.0℃±0.5℃(或各品種項下規定的溫度)。
     。3)供試的液體或固體物質的溶液應充分溶解,供試液應澄清。
     。4)物質的旋光度與測定光源、測定波長、溶劑、濃度和溫度等因素有關。因此,表示物質的旋光度時應注明測定條件。
     。5)當已知供試品具有外消旋作用或旋光轉化現象,則應相應地采取措施,對樣品制備的時間以及將溶液裝入旋光管的間隔測定時間進行規定。


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